HPLC-ELSD测定壳聚糖含量
1. 背景介绍
壳聚糖是甲壳素经脱乙酰化处理后的产物,是一种含有游离氨基的阳离子生物多糖,是一种具有生物活性的物质,具有抗肿瘤、抗凝血、降血脂及增强免疫力的功效,可应用于水处理、医疗卫生、食品及保健食品等领域。目前关于壳聚糖含量的检测方法有分光光度法、电化学法、液相色谱法等。本实验按照《GB/T38479-2021壳聚糖含量测定高效液相色谱法》的要求,采用HPLC-ELSD建立了壳聚糖含量的检测方法,为其质量控制提供有效参考。
2. 测试条件
仪器: | 通微液相色谱系统,配备蒸发光散射检测器 |
色谱柱: | Shodex Asahipak NH2P-50 4E, 250×4.6 mm, 5 μm |
3. 测试结果
1)壳聚糖水解产物氨基葡萄糖盐酸盐对照品典型色谱图
图1 LC-ELSD分离检测氨基葡萄糖盐
2)重复性效果
图2 LC-ELSD分离检测氨基葡萄糖盐酸盐重复性效果
3)线性关系
称取氨基葡萄糖盐酸盐标准品1.0 g,加水溶解并定容至100mL容量瓶中,配制成质量浓度为10 mg/mL的储备溶液。分别量取储备溶液适量,稀释定容至10mL容量瓶中,得到一系列质量浓度为1.0 mg/mL、1.5 mg/mL、2.0 mg/mL、2.5 mg/mL、3.0 mg/mL、3.5 mg/mL的氨基葡萄糖盐酸盐标准品溶液。
4. 结论
采用液相色谱系统,配备通微特色蒸发光散射检测器,可以实现壳聚糖含量的检测,方法准确、灵敏度高,可以满足日常分析检测要求。
5. 配置列表
推荐仪器配置 | 通微液相色谱系统(配梯度泵、自动进样器、柱温箱、蒸发光散射检测器) |
Shodex Asahipak NH2P-50 4E, 250×4.6 mm, 5 μm | |
通微Unimicro ChromStation色谱工作站 |